取本品10g,加80%乙醇50ml,80℃熱浸1小時,濾過,濾液蒸干,殘渣加水50ml溶解,加氯仿振搖提取3次(30ml、20ml、20ml),合并氯仿液,水浴蒸干,殘渣加乙醇1ml溶解,作為供試品溶液。另取槐耳菌質(zhì)對照藥材10g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以氯仿-丙酮-甲醇(12:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視,供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。
主成分為槐耳蛋白多糖,其水解產(chǎn)物含L-巖藻糖(fucose),L-阿拉伯糖(arabinose),D-木糖(xylose),D-甘露糖(mannose),D-半乳糖(galactose),D-葡萄糖(glucose)等6種單糖,及天冬氨酸(aspartic acid),蘇氨酸(threonine),絲氨酸(serine),谷氨酸(glutamicacid),脯氨酸(proline),甘氨酸(glycine),丙氨酸(alanine),胱氨酸(cystine),纈氨酸(valine),蛋氨酸(methionine),異亮氨酸(isoleucine),亮氨酸(leucine),酪氨酸(tyrosine),苯丙氨酸(phenylalanine),賴氨酸(lysine),組氨酸(histidine),色氨酸(Typtophane),精氨酸(arginine)等18種氨基酸組成。
槐耳野生資源稀缺,人工培育困難,生長周期長,生物效應(yīng)低。用固體發(fā)酵法生產(chǎn)槐耳菌質(zhì),液體培養(yǎng)法生產(chǎn)菌絲體。
固體發(fā)酵菌絲體生長溫度5℃,溫度37℃,適pH5.5。
液體培養(yǎng)培養(yǎng)基:玉米粉2%,豆餅粉2%,pH5左右。溫度:27-28℃。
種齡:96h。
接種量:10%-15%。培養(yǎng)時間:6-7d。在上述適宜培養(yǎng)條件下,液體培養(yǎng)槐栓菌的菌絲干重基本穩(wěn)定在2g/100ml
毒性動物急性毒性試驗表明,清膏對小鼠的給藥劑量相當于人臨床劑量的126.6倍;大鼠按95倍灌胃,均未能測出LD50,長期毒性試驗,大鼠按臨床劑量的95倍灌胃3個月,家犬小劑量組為臨床等效劑量,大劑量組為其24.7倍,連續(xù)灌胃6個月,動物生長正常,經(jīng)血象、生化等檢查分析,各組動物都未發(fā)生異常,也未發(fā)現(xiàn)由引起的病理性改變。特殊毒理如小鼠微核及染色體畸變試驗等均為陰性反應(yīng)